8(495)221-90-84
ЕСТЬ ВОПРОСЫ?
СПРОСИ У СПЕЦИАЛИСТА

Наша команда профессионалов ответит на ваши вопросы

 Фенилкетонурия (ФКУ) – наследственное заболевание, характеризующееся нарушением обмена аминокислоты фенилаланина, сопровождающееся умственной отсталостью и различными психическими расстройствами у больных, не получивших своевременного и адекватного лечения в раннем возрасте.

Средняя частота встречаемости ФКУ в России составляет 1 на 7000 новорожденных. Первыми проявлениями болезни служат вялость ребенка, отсутствие интереса к окружающему, иногда повышенная раздражимость, беспокойство, срыгивание, нарушение мышечного тонуса (чаще мышечная гипотония), судороги, признаки аллергического дерматита. Задержка статикомоторного и психоречевого развития, нередко отмечается микроцефалия. Характерны фенотипические проявления такие как гипопигментация кожи, волос, радужной оболочки глаз. Своеобразный «мышиный» запах мочи. Почти у половины больных наблюдаются эпилептические приступы, которые носят упорный характер и плохо поддаются антиконвульсантной терапии.

Фенилкетонурия входит в программу неонатального скрининга, больных детей выявляют в родильных домах и назначают лечение в виде безбелковой диеты.

Тип наследования ФКУ – аутосомно-рецессивный. Заболевание вызывается мутациями в гене ФАГ (PAH) фенилаланингидроксилазы. Ген локализован на длинном плече хромосомы12, участке 12q22-q24.1. На сегодняшний день в гене PAH описано свыше 950 мутаций, частота и встречаемость которых характеризуется существенными межпопуляционными различиями. Однако некоторые из них встречаются с частотой более 1%. Самой распространенной мутацией для жителей России является миссенс-мутация в 12-ом экзоне гена ФАГ – R408W (аллельная частота 49%).

Нарушение метаболизма фенилаланина наблюдается также при недостаточности тетрагидробиоптерина (BH4) - кофактора в реакции гидроксилирования фенилаланина. Мутации в генах синтеза и обмена тетрагидробиоптерина PTS, GCH1, QDPR, PCBD1 являются причинами гиперфенилаланинемий с дефицитом тетрагидробиоптерина типа A, B, C, D соответственно (2% всех ГФА и ФКУ).

В Центре Молекулярной Генетики проводится прямая диагностика фенилкетонурии путем детекции 25 частых мутаций гена PAH:  R408W, IVS12+1G>A, IVS10-11G>A, P281L, R261Q, R252W, IVS4+5G>T, R158Q, R261X, L48S, A403V, Y414C, E280K, E390G, R243Q, R243X,  IVS2+5G>A, IVS2+5G>C, EX5del, A300S, S349P, R111X, I306V, c.47_48delCT, c.664_665delGA. Суммарная информативность системы составляет около 80% от числа поврежденных хромосом.

Больным с мутациями в генах синтеза и обмена BH4 показана заместительная терапия сапроптерином (фармакологический аналог BH4). В течение последних лет было показано, что такое лечение эффективно и для больных с мутациями в гене PAH, при наличии остаточной активности фермента ФАГ. Показано достоверное снижение уровня фенилаланина в крови больных ФКУ, использующих препараты синтетических аналогов кофактора фенилаланингидроксилазы. Малые дозы препарата позволяют существенно расширить диету и улучшить качество жизни больных ФКУ. Причем, чем больше остаточная активность фермента, тем больше эффект от лечения. С другой стороны, при классической ФКУ у больных с двумя тяжелыми мутациями, например, гомозигот по мутации R408W, лечение не эффективно. При остаточной активности ФАГ близкой к нулю, введение кофактора не дает клинически значимого эффекта. Ввиду высокой аллельной частоты мутации R408W и других тяжелых мутаций в России, а также того факта, что ДНК-диагностика является более дешевым и легко осуществимым мероприятием, чем нагрузочные тесты тетрагидробиоптерином, генотипирование с целью выявления пациентов-неответчиков и потенциальных ответчиков является актуальным.

В таблице представлена классификация частых мутаций гена PAH в зависимости от остаточной активности фермента. Красным выделены тяжелые мутации, зеленым – мягкие. При наличии в генотипе двух тяжелых мутаций в гомозиготном или в компаунд-гетерозиготном состоянии, лечение препаратами BH4 не эффективно. При наличии в генотипе хотя бы одной мягкой мутации, показаны нагрузочные тесты препаратами тетрагидробиоптерина.

 

Мутация

Остаточная активность ФАГ, %

BH4-чувствительность

c.47_48delCT

0

-

IVS2+5G>A

0

-

IVS2+5G>C

0

-

R111X

0

-

IVS4+5G>T

0

-

ex5del

0

-

c.664_665delGA

0

-

R243X

0

-

R252W

0

-

R261X

0

-

E280K

2

-

P281L

2

-

S349P

1

-

IVS10-11G>A

5

-

R408W

2

-

IVS12+1G>A

0

-

L48S

39

+

R158Q

10

+

R243Q

14

+

R261Q

44

+

A300S

31

+

I306V

39

+

E390G

62

+

A403V

66

+

Y414C

57

+

В Центре Молекулярной Генетики также проводится поиск мутаций во всех экзонах гена PAH методом прямого секвенирования. Выявленные секвенированием мутации можно классифицировать в зависимости от остаточной активности белка. Данные об остаточной активности мутантного белка содержатся в базе PAHvdb (http://www.biopku.org/pah/). Мутации с остаточной активностью белка меньше 10% классифицируются как тяжелые с отрицательной BH4-чувствительностью. Мутации с остаточной активностью белка больше 10% классифицируются как мягкие с вероятной чувствительностью к BH4. Мутации, для которых неизвестна остаточная активность фермента классифицируются как «мутации с неизвестным клиническим эффектом».

Нами разработаны наборы для ДНК-диагностики фенилкетонурии Наборы предназначены для использования в диагностических лабораториях молекулярно-генетического профиля.

Пренатальная (дородовая) диагностика в семье проводится только при подтвержденном молекулярно-генетическими методами диагнозе у пробанда. При проведении пренатальной ДНК-диагностики в отношении конкретного заболевания, имеет смысл на уже имеющемся плодном материале провести диагностику частых анеуплоидий (синдромы Дауна, Эдвардса, Шерешевского-Тернера и др.). Актуальность данного исследования обусловлена высокой суммарной частотой анеуплоидий – около 1 на 300 новорожденных, и отсутствием необходимости повторного забора материала.

ИсследованиеЦенаСрок
исполнения
(дней)
Расширенный поиск частых мутаций в гене PAH (25 шт.) 6 500 14
Расширенный поиск частых мутаций в гене PAH для ядерной семьи (3 чел.) 13 000 14
Поиск мутаций в гене PAH 18 000 21
Поиск выявленных в данной семье мутаций у родственника 4 000 21
Пренатальная ДНК-диагностика 8 100 14